土壤硝態(tài)氮測(cè)試盒(微量法)
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土壤硝態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒說明書 微量法
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào):4079
規(guī)格:100T/96S
試劑一:粉劑×2 支,4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加 1mL 濃硫酸充分溶解。試劑二:液體 40mL×1 瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 瓶,4℃保存。10 mg 硝酸鉀,臨用前加入 1.386mL 蒸餾水溶解,配成 1000μg/mL
的 NO3--N 標(biāo)準(zhǔn)液
硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接關(guān)系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。
在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應(yīng)生成硝基水楊酸,在堿性條件下(PH>12)呈黃色,其顏色深淺與含量成正比,即可計(jì)算得硝態(tài)氮含量。
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、振蕩器、蒸餾水。
一、硝態(tài)氮提取:
按照土壤質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 土樣,加入 1mL 蒸餾水)加入蒸餾水,置于振蕩儀中振蕩提 1h,25℃,10000 離心 10min,取上清待測(cè)。
1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 410nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將 1000μg/mL NO3--N 標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水 40 倍稀釋成 25μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3、 操作表:
試劑名稱 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本(μL) | 8 | ||
標(biāo)準(zhǔn)溶液(μL) | 8 | ||
蒸餾水(μL) | 8 | ||
試劑一(μL) | 12 | 12 | 12 |
充分混勻,25℃靜置 30min | |||
試劑二(μL) | 280 | 280 | 280 |
混勻,渦旋振蕩,使出現(xiàn)的沉淀充分溶解,取 0.2mL 于微量玻璃比色皿或 96 孔板中測(cè)定 410nm 處吸光值 A,計(jì)算△A=A 測(cè)定管-A 空白管,△A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。 |
NO3--N 含量(μg/g 土壤)=△A÷(△A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)準(zhǔn))×V 提取÷W=25×△A÷△A 標(biāo)準(zhǔn)÷W。
W:樣本質(zhì)量,g;C 標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,25μg/mL;V 提?。禾崛∫后w積,1mL。
1、 試劑一配制好后盡快使用,4℃可保存一周。
2、 試劑一和試劑二均具有強(qiáng)腐蝕性,操作時(shí)需做好防護(hù)措施。
3、 △A 大于 1.5 時(shí),建議將樣品稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。